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本试剂采用独特配方的阳离子聚合物为主要成分，其高度的分支结构确保了高正离子电荷密度，使得与带有负电荷的外源基因结合更有效，容易被细胞吸收，排斥少，因此能显著提高外源基因的转染效率。根据长时间的实验验证，PolyBalb转染每微克DNA用量少，效率高，成功率高，适合多种类型的细胞系，细胞存活率高，可以广泛用于瞬时转染和稳定转染。

基因转染需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送到细胞内。目前，最常用的转染试剂是阳离子脂质体和阳离子聚合物，它们的特点和病毒类似，容易透过细胞膜。其中，阳离子脂质体在体外基因转染中有很高的效率，然而在体内，它迅速被血清清除，在肺组织内累积，诱发强烈的抗炎反应，这将导致高水平的毒性，因此，在很大程度上限制了其应用。由于阳离子脂质体的局限性，阳离子聚合物转染试剂日益受到重视。

组分	0.5mL	1mL
PolyBalb非脂质体高效转染试剂	0.5mL	1mL
说明书	1份	1份

保存：-20℃，有效期2年。

• 影响转染效率的因素有很多，如细胞类型、细胞状态及密度、DNA转染量、转染试剂与DNA比例等，应该在具体实践中优化来确定最佳转染条件。
  
• 细胞：为了取得较高的转染效率，推荐使用在50代以内的细胞进行转染。
  
• DNA的质量：为了取得较高的转染效率，推荐使用高纯度的质粒，OD260/OD280≥1.8。
  
• PolyBalb的用量：在体外细胞转染试验中，对于接种细胞密度在60～90%之间的实验样本，可通过预实验在PolyBalb (μL)：DNA (μg)=2:1~6:1之间选择最佳的比例。

• 准备细胞（24孔板为例）：
  
  • 转染前18～24小时，接种适量细胞于24孔板中，并将细胞培养板置于37℃，5% CO₂培养箱培养，转染前细胞密度达到60～90%为理想状态（具体密度视细胞的不同可进行适当调整）。
    
  • 转染前PBS洗涤细胞2～3次，并更换新鲜培养液；
• 准备转染工作液：
  
  • 将0.8～1μg质粒DNA溶于50μL转染稀释液中，轻轻混匀，室温静置5min；
    
  • 将2μL的PolyBalb溶于50μL转染稀释液，轻轻混匀，室温静置5min；
    
  • 将含有PolyBalb的稀释液加入含有粒DNA的稀释液中，轻轻混匀，室温静置15min；
• 将上述转染工作液，逐滴滴入对应细胞培养液中，轻轻混匀后置于37℃，5% CO₂培养箱中进行培养；
  
• 4～8小时后，更换新鲜培养基；
  
• 转染24～48小时后，观察或收取细胞。

图1．pEGFP-N1质粒转染HepG2细胞。转染前一天将HepG2细胞接种于24孔板中，10⁵个细胞/孔；转染更换新鲜培养基，按PloyHigh (μL)：DNA (μg)= 2：1进行转染；转染4小时后更换培养基，24小时后，奥林巴斯IX73荧光倒置显微镜(Olympus)下观察。
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